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骨髓間充質(zhì)干細胞常用的分離方法有哪些

更新時間:2022-04-25  |  點擊率:1681
  骨髓間充質(zhì)干細胞是骨髓基質(zhì)干細胞,是人們在哺乳動物的骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的一種具有分化形成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)及成肌細胞的多種分化潛能的細胞亞群。它們對骨髓中的造血干細胞(HSC)不僅有機械支持作用,還能分泌多種生長因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)來支持造血。
  目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法,全骨髓法即根據(jù)干細胞在低血清培養(yǎng)基中有貼壁優(yōu)勢特性,定期換液除去不貼壁細胞,從而達到純化及擴增MSC的目的。密度梯度離心法即根據(jù)骨髓中各細胞成分比重的不同,分離單核細胞進行貼壁培養(yǎng)。二者本質(zhì)上無多大區(qū)別。隨著對MSC表面抗原認識的深入,又有人利用免疫方法如流式細胞儀法、免疫磁珠法等對其進行分離純化。但經(jīng)過流式或磁珠分選后的細胞出現(xiàn)了增殖緩慢等一些問題,加之成本較高和技術(shù)的難度,在某種程度上限制了這些方法的廣泛應用。
  動物實驗已經(jīng)證實,骨髓間充質(zhì)干細胞單獨應用可以較好地促進骨折愈合和軟骨損傷的修復,通過體外培養(yǎng)使其覆蓋于陶瓷支架或碳纖維網(wǎng)絡等再植入患處效果更明顯。骨髓間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng),因具有黏附于塑料培養(yǎng)皿壁的能力而易于分享,體外經(jīng)過長期連續(xù)培養(yǎng)和冷凍保存后不會改變其分化潛能,植入以后可以分化成造血以外的組織,如肺、軟骨、骨、神經(jīng)等,并表現(xiàn)出相應組織細胞的表型。
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