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小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1的培養(yǎng)操作步驟

小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1能夠特異性表達(dá)成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Runx-2和堿性磷酸酶等早期成骨分化表型標(biāo)志物,已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于成骨分化的研究中。成骨細(xì)胞的來源主要有骨、骨膜、骨髓及骨外組織。及人的胚胎顱骨或新生動(dòng)物的顱骨為成骨細(xì)胞的常用來源。小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1的培養(yǎng)操作步驟：1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-3...

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小鼠成纖維細(xì)胞組織塊的培養(yǎng)方法說明

成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織中最常見而且數(shù)量較多的一種細(xì)胞，位于膠原纖維近旁并依附于其上。此細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)可隨其功能狀態(tài)的不同而改變。在功能活動(dòng)旺盛時(shí)，成纖維細(xì)胞的胞體較大，呈扁平星形，有突起。胞核呈卵圓形，核染色質(zhì)較少，著色淺，核仁明顯。胞質(zhì)較多，弱鹼性，內(nèi)含豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核蛋白體、高爾基復(fù)合體以及微絲和微管等結(jié)構(gòu)，表明此種細(xì)胞具有合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和多糖蛋白，形成膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維和基質(zhì)的作用。在相對(duì)靜止或功能活動(dòng)不活躍時(shí)的細(xì)胞，稱為纖維細(xì)胞。這種細(xì)胞...

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人膜間皮細(xì)胞使用前要做好哪些工作

間皮細(xì)胞就是構(gòu)成間皮的細(xì)胞，間皮是由一層細(xì)胞組成的，胸膜，腹膜和器官相接的面上都有間皮細(xì)胞。間皮的作用是起到潤(rùn)滑作用，使身體內(nèi)的器官與器官、器官與胸膜或與腹膜之間能得到良好的保護(hù)，不會(huì)因?yàn)榛ハ嗄p受傷。間皮的潤(rùn)滑和保護(hù)作用就是靠間皮細(xì)胞所分泌的細(xì)胞外基質(zhì)、玻尿酸類物質(zhì)做到的，所以間皮細(xì)胞就是身體內(nèi)的正常細(xì)胞。人膜間皮細(xì)胞使用前要做好哪些工作：1）凍存人膜間皮細(xì)胞的復(fù)蘇：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在10...

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小鼠骨樣細(xì)胞是維持成熟骨新陳代謝的主要細(xì)胞

小鼠骨樣細(xì)胞是成熟骨組織中的主要細(xì)胞，相當(dāng)于人的成年期，由骨母細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來。當(dāng)新骨基質(zhì)鈣化后，細(xì)胞被包埋在其中。此時(shí)細(xì)胞的合成活動(dòng)停止，胞漿減少，成為骨細(xì)胞。骨細(xì)胞能產(chǎn)生新的基質(zhì)，改變晶體液，使骨組織鈣、磷沉積和釋放處于穩(wěn)定狀態(tài)，以維持血鈣平衡。骨細(xì)胞對(duì)骨吸收和骨形成都起作用，是維持成熟骨新陳代謝的主要細(xì)胞。骨組織的細(xì)胞(小鼠骨樣細(xì)胞)成分包括骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞。只有骨細(xì)胞存在于骨組織內(nèi)，其他三種細(xì)胞均位于骨組織的邊緣。小鼠骨樣細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞。在骨形成的...

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人胚腎細(xì)胞293T的處理要注意以下幾點(diǎn)

人胚腎細(xì)胞；293，上皮狀，早期報(bào)道中指出該細(xì)胞基因組中含有腺病毒5（Ad5）基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1～4344位線性核苷酸整合入細(xì)胞染色體19q13.2。該細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主?？杀磉_(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級(jí)別為2級(jí)。人胚腎細(xì)胞293T的處理要注意以下幾點(diǎn)：1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃...

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小鼠胚胎成骨細(xì)胞MC3T3-E1的儲(chǔ)存要注意的事項(xiàng)

從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長(zhǎng)的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。MC3T3亞克隆4（ATCCCRL-2593）和MC3T3亞克隆14（ATCCCRL-2594）在抗壞血酸和3到4mM無機(jī)磷酸鹽中生長(zhǎng)表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。它們10天后形成一個(gè)礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。MC3T3亞克隆24（ATCCCRL-2595)和MC3T3亞克隆30(ATCCCRL-2596)在抗壞血酸中生長(zhǎng)表現(xiàn)出很差的成...

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小鼠成纖維細(xì)胞L929傳代流程的注意事項(xiàng)

小鼠成纖維細(xì)胞L929分離自小鼠皮膚組織的貼壁細(xì)胞，成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞(mesenchymalcell)分化而來。功能活躍的細(xì)胞稱為成纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。纖維細(xì)胞（fibrocyte），結(jié)締組織中數(shù)目最多的細(xì)胞，相對(duì)靜止的細(xì)胞稱纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞數(shù)目最多，胞體大，為多突的紡錘形或星形的扁平細(xì)胞，細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，細(xì)胞輪廓不清，具有突起。其...

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介紹DC細(xì)胞的兩種來源途徑

樹突狀細(xì)胞（Dendriticcells,DC）是機(jī)體功能較強(qiáng)的專職抗原遞呈細(xì)胞，它能高效地?cái)z取、加工處理和遞呈抗原，未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。DC的來源有兩條途徑：①髓樣干細(xì)胞在GM-CSF的刺激下分化為DC，稱為髓樣DC，也稱DCl，與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞有共同的前體細(xì)胞；包括朗格漢斯細(xì)胞，間皮（或真皮）DCs以及單核細(xì)胞衍生的DCs等，②來源于淋巴樣干細(xì)胞，稱為淋巴樣DC或漿細(xì)胞樣DC，即DC2，...

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